T/AHFIA 042-2019
濃香型白酒窖泥水溶性鉀的測(cè)定 離子色譜 法
Determination of water-soluble potassium in cellar mud of nongxiangxing baijiu by ion chromatography
- 標(biāo)準(zhǔn)號(hào)
- T/AHFIA 042-2019
- 發(fā)布
- 2019年
- 發(fā)布單位
- 中國(guó)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)
- 當(dāng)前最新
- T/AHFIA 042-2019
- 適用范圍
- 主要條款： 本標(biāo)準(zhǔn)的章節(jié)由范圍、規(guī)范性引用文件、原理、試劑與材料、儀器與設(shè)備、分析步驟、計(jì)算結(jié)果、精密度、檢出限和定量限組成。 本標(biāo)準(zhǔn)中主要技術(shù)參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證如下： 1、主要技術(shù)參數(shù)的確認(rèn) 1.1超聲提取時(shí)間確定 樣品制備過(guò)程：方法中窖泥樣品需經(jīng)去離子水超聲提取、離心、稀釋（適當(dāng)倍數(shù)）等處理操作；其中超聲提取的程度直接影響窖泥中水溶性鉀測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，分別設(shè)定超聲提取時(shí)間1、3、5、7、9、11 min，進(jìn)行鉀離子提取實(shí)驗(yàn)，得提取液中鉀離子含量隨超聲提取時(shí)間的變化曲線，由其得出最佳超聲提取時(shí)間。如圖1所示，超聲提取時(shí)間為5 min時(shí)，窖泥樣品提取液中鉀離子得濃度最高，并且隨著提取時(shí)間增加鉀離子濃度不在變化。所以本標(biāo)準(zhǔn)選擇超聲提取時(shí)間為5 min。 圖1 提取液中鉀離子濃度隨超聲提取時(shí)間的變化曲線 1.2色譜條件的確定 1.2.1色譜柱：離子色譜柱的類型很多，根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)的離子，選擇IonPacTM CS 12 A RFICTM 分離柱(4×250 mm)，它對(duì)水中陽(yáng)離子的分離具有較好的表現(xiàn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證它適用于本方法，可實(shí)對(duì)窖泥提取液中鉀離子進(jìn)行有效的分離。 1.2.2流動(dòng)相：根據(jù) 報(bào)道甲基磺酸是鈉、鉀等離子是效果較好的淋洗液，現(xiàn)選擇甲基磺酸為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，經(jīng)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)在20 mmol時(shí)，鉀離子出峰時(shí)間較快，峰形較好。 1.2.3流速：流速越慢出峰時(shí)間越遲，峰分離度越大，峰性越寬，反之流速越大，出峰時(shí)間越快，風(fēng)分離度越小，峰形越窄；經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定在流速為1.0 ml/ min時(shí)，峰分離度滿足要求，峰形較好，用時(shí)較短，如圖2。 圖2 2、試驗(yàn)驗(yàn)證 標(biāo)準(zhǔn)制定單位通過(guò)精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和回收率試驗(yàn)驗(yàn)證檢測(cè)效果，獲得的平行測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%均小于5，其精密度符合方法學(xué)的要求；同時(shí)進(jìn)行了異地驗(yàn)證試驗(yàn)及方法不確定度的計(jì)算，提高了本方法規(guī)范性、統(tǒng)一性和科學(xué)性。 2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 分別吸取10mg/L鉀離子標(biāo)準(zhǔn)使用液 0、0.250、0.500、1.000、2.500 mL，分別放入5只5 ml容量瓶中，用超純水定容至刻度，加上鉀離子標(biāo)準(zhǔn)使用液，搖勻得0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L的鉀離子標(biāo)準(zhǔn)系列溶液；r2=0.99998，線性良好,如下圖3。 圖3 鉀離子標(biāo)準(zhǔn)系列線性關(guān)系圖 2.2精密度 對(duì)同一風(fēng)干窖泥樣品，按照樣品制備方法平行制備6份樣品，并用本方法進(jìn)行鉀離子檢測(cè)（其中一個(gè)樣品重復(fù)進(jìn)樣6次），所得重復(fù)性和重現(xiàn)性結(jié)果如表1所示 表1 窖泥中水溶性鉀離子重復(fù)性、重現(xiàn)性檢測(cè)結(jié)果(單位：mg/100g) 項(xiàng)目 次數(shù) 1 2 3 4 5 6 RSD 重復(fù)性 105.52 105.88 106.00 106.50 106.45 106.71 0.45% 重現(xiàn)性 102.06 105.48 101.93 107.92 100.03 106.77 3.01% 由上表知，六次重復(fù)測(cè)定結(jié)果的RSD為0.45%、重現(xiàn)性測(cè)定結(jié)果的RSD為3.01%，方法重復(fù)性、重現(xiàn)性良好。 2.3加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn) 窖泥中水溶性鉀的含量，單位為mg /100g，按公式（1）計(jì)算： －－－－－－－－（1） 式中： n——稀釋倍數(shù)； C——待測(cè)液中鉀離子的濃度mg/L； m——窖泥樣品質(zhì)量，單位為克（g）； V——待測(cè)液體積； 所得結(jié)果應(yīng)表示至小數(shù)點(diǎn)后2位數(shù)字。 取3個(gè)已知含量的風(fēng)干窖泥樣品，每個(gè)等量量取三份放入50mL離心管，并分別加入1mL、2mL和3mL的已知濃度的鉀離子標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1000mg/L)按照標(biāo)準(zhǔn)所述方法提取、離心、稀釋等操作后，按本方法檢測(cè)，計(jì)算所得回收率均在80%-120%之內(nèi)，平均回收率為96.40%如下表2。 表2窖泥鉀離子的加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 序號(hào) 樣品含量（mg） 加入量（mg） 測(cè)得量（mg） 回收率(%) 平均回收率（%） 1 4.21 1.00 5.18 97.28 96.40 2 4.21 2.00 6.11 95.02 3 4.21 3.00 7.01 93.41 4 4.88 1.00 5.90 101.62 5 4.88 2.00 6.81 96.56 6 4.88 3.00 7.70 97.22 7 5.69 1.00 6.70 101.09 8 5.69 2.00 7.53 92.30 9 5.69 3.00 8.58 96.47 2.4檢出限、定量限 以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點(diǎn)的信噪比（S/N=187）及濃度值計(jì)算； 檢出限：信噪比是3時(shí)，樣品的濃度； 定量限：信噪比是10時(shí)，樣品的濃度； 項(xiàng)目 計(jì)算公式 結(jié)果 檢出限 peak.amount*3/peak.S/N 0.03mg/100g 定量限 peak.amount*10/peak.S/N 0.08mg/100g 2.5異地驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 取同一樣品，在異地實(shí)驗(yàn)室按照標(biāo)準(zhǔn)文本中的方法提取、離心、稀釋后，上機(jī)檢測(cè)，計(jì)算樣品中水溶性鉀含量，對(duì)比三實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的結(jié)果其相對(duì)偏差（文本要求≤10%），結(jié)果如下表3，驗(yàn)證方法準(zhǔn)確性符合要求。 表3窖泥中水溶性鉀異地實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果 異地實(shí)驗(yàn)室 檢測(cè)結(jié)果（mg/100g） 相對(duì)偏差 安徽瑞思威爾科技有限公司 116.00 1.46% 安徽潤(rùn)安信科檢測(cè)科技有限公司 118.17 3.21% 安徽古井貢酒股份有限公司 109.06 4.66% 2.6方法不確定度 根據(jù)《濃香型白酒窖泥中水溶性鉀的測(cè)定 離子色譜法》的實(shí)驗(yàn)全過(guò)程對(duì)該測(cè)量過(guò)程進(jìn)行不確定度分析，找出影響測(cè)量過(guò)程的不確定度分量來(lái)源并進(jìn)行評(píng)定。 2.6.1測(cè)量方法簡(jiǎn)述 2.6.1.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 1）吸取1000mg/L的K+標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.50mL混合于50mL容量瓶中，用水稀釋并定容，配制成標(biāo)準(zhǔn)使用液10.0mg/L，使用標(biāo)準(zhǔn)使用液配制成標(biāo)準(zhǔn)系列使用溶液，K+的濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L。 2.6.1.2樣品處理 2）稱取2.0g待測(cè)恒重窖泥樣于50mL離心管中，加入50mL水，室溫下超聲提取5分鐘，然后離心處理，再經(jīng)0.22μm濾膜針頭過(guò)濾器過(guò)濾，稀釋獲得前處理樣品。 2.6.1.3 色譜條件 分析柱：IonPacTM CG 12 A RFICTM (4×50 mm)，IonPacTM CS 12 A RFICTM (4×250 mm)； 淋洗液：20 mmol 甲基磺酸； 流速：1 mL/min； 柱溫：25 ℃； 檢測(cè)器：電導(dǎo)檢測(cè)； 進(jìn)樣量：25 μL。 2.6.2 不確定度評(píng)定 2.6.2.1 A 類不確定度的計(jì)算 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的重復(fù)性測(cè)定所得重復(fù)性不確定度可以用來(lái)計(jì)算與各重復(fù)性有關(guān)的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度，屬于 A 類不確定度。在本實(shí)驗(yàn)中主要是樣品平行測(cè)定和標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積測(cè)定引起的不確定度。 1）樣品平行測(cè)定的不確定度 Urel（) 在重復(fù)性條件下，對(duì)已處理樣品進(jìn)行了 6 次獨(dú)立測(cè)試，其結(jié)果分別為105.52、105.89、106.00、106.50、106.45、106.71，平均值為106.18，標(biāo)準(zhǔn)偏差S=0.45，則算術(shù)平均值的不確定度，則 2.6.2.2 B 類不確定度的計(jì)算 1）標(biāo)準(zhǔn)溶液純度的不確定度Urel(ρ) 鉀離子標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，證書(shū)上給出的不確定度為 0.2%，則 Urel(ρ) 2)標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋過(guò)程引入的不確定度稀釋 Urel(f) ①移液管（1.00mL） 的不確定度：1.00ml 刻度移液管允許差為0.7%，按照均勻分布： l， ②實(shí)驗(yàn)室溫度在±3℃之間變動(dòng)，溫度差異引起體積的變化為：1000×3×4.04×10-4 =1.212μL，按均勻分布計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)不準(zhǔn)確度為: μL ③則移液管帶來(lái)的合成不確定度為： μL ④相對(duì)不確定度: 3) 容量瓶 (50mL) 體積帶來(lái)的不確定度： ① 20℃時(shí) 50mL A 級(jí)容量瓶計(jì)量校準(zhǔn)其允許差為±0.05mL，按均勻分布計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)不確定度: ② 實(shí)驗(yàn)室溫度在±3℃之間變動(dòng)，溫度差異引起體積的變化為 50×3×2.1×10-4=0.032 mL，標(biāo)準(zhǔn)不準(zhǔn)確度為： ③ 50mL 容量瓶體積的標(biāo)準(zhǔn)不準(zhǔn)確度為： ④ 相對(duì)不確定度為： Urel (V容50) =0.034/50= 0.068% 4) 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋帶來(lái)的不確定度 Urel (f)：使用規(guī)格為200μL及1000μL移液器配制標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度。 ① 移液器（5000μL）允許誤差0.7%， 相對(duì)不確定度為： Urel (V移3) =0.808/200= 0.404% ②移液器（1000μL）允許誤差0.1%， 相對(duì)不確定度為： Urel (V移4) =0.577/1000= 0.05% 5) 電子天平稱量帶來(lái)的不確定度Urel(c)：電子天平感量為0.0001g，稱量 2.6.3 合成不確定度 則 UC=UCrel×=0.53%×106.18=0.56 mg/100g